一般来说，没有感染过乙型肝炎病毒的人应该注射乙型肝炎疫苗。重点应用者有两部分，一部分是新生儿、学龄前儿童，特别是病毒携带者的新生儿，另一部分是危险群体，包括接触乙型肝炎患者的医务人员、直接接触血液、分泌物的医务人员、乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者的配偶、家庭成员或密切接触者。
接种乙型肝炎疫苗后，未必能预防乙型肝炎病毒感染和乙型肝炎发病，只有注射疫苗后能产生足够抗体的人才具有预防作用，足够抗体指乙型肝炎病毒表面抗体滴度在1:10以上。注射后产生的保护性抗体不是永久性的，一般只能维持3~25年，今后必须在医生的指导下加强注射。
注射乙型肝炎疫苗后产生的足量抗体只能预防乙型肝炎病毒感染和乙型肝炎发病。对其他类型的病毒性肝炎没有预防作用。接种者还可能感染甲、丙、戊、庚肝等病毒。注射乙型肝炎疫苗前，必须检查乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs)和核心抗体(抗-HBc)，检查结果阴性者可注射，2岁以内的儿童无密切接触史，无检查，直接注射乙型肝炎疫苗。
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