（一）标本的采集及处理
标本的采集和预处理：用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。标本核酸的提取，按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液37℃下处理过夜；
（二）PCR扩增
1、 引物设计和合成：HPV基因组可分为早期区（E）和晚期区（L），每区含一系列开放读码框架（ORF）。
2、PCR反应试剂：Taq DNA聚合酶（2U/ml）、10mmol/L dNTP贮备液，10×PCR缓冲液，100μmol/L MY11和MY09贮备液，灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。
3、PCR扩增方法和程序：以100μl PCR反应液，用无菌0.5ml硅化塑料离心管为反应管进行扩增反应。
（三）扩增产物的检测和分析
1、凝胶电泳：扩增反应结束后，取出反应管，冷却至室温，取10μl扩增产物用5%-7%聚丙烯酰胺凝胶或1.5%琼脂糖电泳，溴化乙锭染色，紫外分析仪下分析结果，分子量约为450bp处出现明显的DNA带。
2、核酸杂交：如果凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时，可用标记的公用混合探针和（或）型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。
用PCR方法检测HPV比核酸杂交方法优越。其敏感性高，GP-PCR方法以凝胶电泳直接分析结果，可检出标本中200个拷贝的HPV DNA，若以核酸杂交检测PCR产物，敏感性提高，能检出10个拷贝的HPV DNA。
鉴于PCR技术的高度敏感性，以生殖道脱落细胞为检材足以满足试验要求，避免了活检取材、研磨组织繁杂操作。一般情况下，PCR扩增产物经凝胶电泳，观察产生的DNA可直接作出诊断。因此，PCR技术检测HPV实验周期短、简便快速。
尖锐湿疣的诊断方法有哪些？如何早期发现尖锐疣湿
随着经济社会的全面发展，人民生活水平的提高，已经沉默了几十年的性病，悄悄地来到我们的社会，腐蚀了我们健康的肌肉。衣食思淫欲一词成为预言，物质丰富，无法消除人们精神生活上的不足，无法阻止人们思想的安静滑坡，随意改变性态度，导致感染性疾病的人逐年上升，成为社会顽固的疾病、毒瘤。
身体出现外阴瘙痒、肛门周围瘙痒症状时，可能是尖锐湿疣，但仅凭症状无法确诊的是尖锐湿疣，应该有清晰的认识，是什么原因，必须尽快去医院皮肤病科确诊。
尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒引起的，表现为生殖器周围的丘疹、角化斑块、乳头样或菜花样赘生物，易复发。男性容易发生的部分是冠状沟、包皮、系带、尿道口、肛门周围等，女性是阴道口、尿道口、会阴部、宫颈等，少数生殖器以外的部分发生在口、腋、乳房、指间、喉咙等。这是尖锐湿疣的主要症状特征，外阴瘙痒、肛门周围瘙痒也确实是尖锐湿疣的症状，但不太典型，有这样的症状，不能确诊的是尖锐湿疣，也有可能是其他类型的皮肤病。
确认是否是尖锐湿疣，可以进行以下检查。
一、醋酸白实验是最常用、最简单的检查方式。用3%~5%醋酸液局部涂抹或湿敷5~10分钟在HPV感染区域变白，即醋酸白现象。但是，特异性不高，一些慢性炎症，如念珠菌性外阴炎、生殖器部位外伤、非特异性炎症等也会出现假阳性。
二、细胞学检测，此检测相对准确。用阴道或宫颈疣组织涂层，巴氏染色，空泡化细胞和角化不良细胞同时存在，对尖锐湿疣有诊断价值。
三、组织病理检查，这是可确诊的检查方式。棘层上和粒子层出现空泡化细胞是诊断HPV感染的重要证据。
。确诊尖锐湿疣不知道什么方法治得好
人乳头瘤病毒（HPV）可导致出现尖锐湿疣这种性病严重损害健康，建议患者要到正规医院及早治疗，清除病毒防止疾病反复。注意个人卫生，应避免性生活，防止交叉感染。平时需要注意局部的清洁，养成个人良好的生活习惯以防止尖锐湿疣的进一步发展。
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